UDC 618.177–089.888.11
DOI: 10.64831/2619-0001.2024.1.252731
П.С. Гамидова¹, Н.П. Макарова¹, д.б.н., В.Ю. Смольникова¹, д.м.н., Н.Н. Лобанова¹, Е.В. Кулакова¹, д.м.н., Е.Е. Брагина², д.б.н.
¹ ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва, Россия
² НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», г. Москва, Россия
РЕЗЮМЕ. Привычное невынашивание беременности (ГНБ) является серьезной проблемой, с которой сталкиваются многие пары, стремящиеся к рождению здорового ребенка. В программе лечения бесплодия методами вспомогательной репродукции (ВРТ) особенное внимание следует уделить мужскому бесплодию, которое оказывает значительное влияние на успешность ВРТ и исход беременности. Согласно исследованиям до 50% случаев ПНБ связаны с мужским фактором бесплодия. Поэтому необходимы методы отбора компетентных сперматозоидов для оплодотворения, чтобы снизить риск прерывания беременности. Одним из таких методов является отбор по мембранному дзета-потенциалу. Показано, что осадок эякулята, в котором сперматозоиды отобраны по мембранному дзета-потенциалу, содержит 16,3% гамет с аномально конденсированным хроматином в отличие от стандартного метода градиента плотностей — 19,38% (p < 0,01). Представлены результаты трансмиссионной электронной микроскопии сперматозоидов с различной упаковкой ДНК на протамины. Метод селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу, как показали результаты настоящего исследования, позволяет отобрать мужские гаметы со зрелым хроматином на этапе подготовки эякулята к оплодотворению в программах ВРТ. Необходимо расширение исследований, направленных на селекцию мужских половых клеток на эмбриологическом этапе, чтобы повысить эффективность лечения.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ВСПОМОГАТЕЛЬНАЯ РЕПРОДУКЦИЯ, БЕСПЛОДИЕ, ОПЛОДОТВОРЕНИЕ, ОТБОР ПО МЕМБРАННОМУ ДЗЕТА-ПОТЕНЦИАЛУ
ДЛЯ ЦИТИРОВАНИЯ / FOR CITATION: Гамидова П.С., Макарова Н.П., Смольникова В.Ю. и соавт. Особенности хроматинового статуса сперматозоидов при отборе по мембранному дзета-потенциалу в программах лечения бесплодия методами ВРТ. Медицинский оппонент. 2024; 1 (25): 27–31. [Gamidova P.S., Makarova N.P., Smolnikova V.Yu. et al. Features of the chromatin status of spermatozoa during selection by membrane zeta potential in infertility treatment programs using ART methods. Meditsinskiy opponent = Medical Opponent. 2024; 1 (25): 27–31. (In Russ.)].
UDC 618.177-089.888.11
P.S. Gamidova¹, N.P. Makarova¹, V. Yu. Smolnikova¹, N.N. Lobanova¹, E.V. Kulakova¹, E.E. Bragina²
¹ FSBI «National medical research center for obstetrics, gynecology and perinatology named after academician V.I. Kulakov» Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow, Russia
² Research Institute of Physical and Chemical Biology named after. A.N. Belozersky Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education «Moscow State University named after M.V. Lomonosov», Moscow, Russia
SUMMARY. Recurrent pregnancy loss (RPL) is a serious problem faced by many couples seeking to have a healthy baby. In the infertility treatment program using assisted reproduction (ART), special attention should be paid to male infertility, which has a significant impact on the success of ART and pregnancy outcome. According to studies, up to 50% of cases of RPL are associated with male factor infertility. Therefore, methods for selecting competent sperm for fertilization are needed to reduce the risk of miscarriage. One such method is membrane zeta potential selection. It was shown that the ejaculate sediment, in which spermatozoa were selected by membrane zeta potential, contains 16.3% of gametes with abnormally condensed chromatin, in contrast to the standard density gradient method — 19.38% (p < 0.01). The results of transmission electron microscopy of spermatozoa with different DNA packaging into protamines are presented. The method of sperm selection by membrane zeta potential, as shown by the results of this study, makes it possible to select male gametes with mature chromatin at the stage of preparing the ejaculate for fertilization in ART programs. It is necessary to expand research aimed at selecting male germ cells at the embryological stage in order to increase the effectiveness of treatment.
KEYWORDS: ASSISTED REPRODUCTION, INFERTILITY, FERTILIZATION, SELECTION BY MEMBRANE ZETA POTENTIAL
При лечении бесплодия, особенно при привычном невынашивании беременности (ПНБ) после переноса эмбриона хорошего качества в полость матки в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) часто большое внимание уделяют здоровью женщины, при этом не обращая должного внимания на статус мужского репродуктивного здоровья [1]. Мужское бесплодие может оказывать значительное влияние на успешность ВРТ и исход беременности. Согласно исследованиям, до 50% случаев ПНБ связаны с мужским фактором бесплодия [2]. Поэтому при планировании программ лечения бесплодия методами ВРТ необходимо учитывать возможное присутствие мужского фактора как одной из основных причин повторных потерь беременности. В литературе описаны различные подходы к диагностике и лечению мужского бесплодия в контексте программ ВРТ при привычном невынашивании беременности, все они направлены на улучшение качества мужских половых клеток. Важную роль в процессе оплодотворения и последующем развитии эмбриона играет хроматин сперматозоидов. Исследования показывают, что его качество может оказывать влияние на успешность беременности и вынашивание [3]. Недостаточно компактное состояние хроматина или его повреждение могут привести к различным патологиям в развитии эмбриона, что может стать причиной привычного невынашивания беременности. В связи с этим анализ статуса хроматина сперматозоидов является важным этапом в оценке мужского фактора бесплодия и планировании лечения [4]. Однако на эмбриологическом этапе программ лечения бесплодия необходима разработка лабораторных методов, которые позволили бы оптимизировать отбор более фертильных мужских гамет, особенно в случае множественных неудачных попыток ВРТ.
Исследования по селекции сперматозоидов с использованием дзета-потенциала — относительно новое и перспективное направление в области репродуктивной медицины [5–7]. Дзета-потенциал представляет собой электрический потенциал, который возникает вокруг частицы в жидкости и может быть использован для разделения частиц по их электрическим свойствам. В контексте селекции сперматозоидов дзета-потенциал может быть применен для отделения сперматозоидов с различными характеристиками, такими как размер, форма, подвижность и электрический заряд. Данный метод позволяет выделить высококачественные сперматозоиды, что может повысить эффективность процесса оплодотворения и улучшить шансы на зачатие. Несмотря на то что исследования по селекции сперматозоидов с использованием дзета-потенциала еще находятся на начальной стадии, результаты предварительных исследований показывают перспективность этого метода для улучшения качества спермы и повышения шансов на успешное зачатие.
На основании вышесказанного цель настоящего исследования — оценить возможности селекции сперматозоидов по целостности хроматина с помощью мембранного дзета-потенциала у супружеских пар в программах лечения бесплодия методами ВРТ.
Настоящее исследование было проведено на базе ФГБУ «НМИЦ АГП имени В.И. Кулакова» Минздрава России (директор — академик РАН, д.м.н., проф. Г.Т. Сухих) в отделении вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова (руководитель — д.м.н., проф. Е.А. Калинина). Было отобрано 24 образца нативного эякулята у мужчин, обратившихся для лечения бесплодия методами ВРТ. Критерии включения: возраст мужчин от 18 до 40 лет, у супруги в анамнезе два и более эпизода невынашивания беременности в сроке до 12 недель гестации (от данного полового партнера), нормальные кариотипы супругов, концентрация сперматозоидов не менее 10 млн/мл, подвижность в пределах нормальных значений (PR% > 25%). Исследование проходило по типу «случай — контроль». Все мужчины подписали информированное добровольное согласие на участие в исследовании. Работа была поддержана на заседании комиссии по биоэтике ФГБУ «НМИЦ АГП имени Кулакова» Минздрава России. Перед включением в программу лечения все мужчины были обследованы согласно Приказу Минздрава России от 31 июля 2020 г. № 803н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению». Эякуляты собирали в стерильные одноразовые контейнеры после 2–3 дней полового воздержания. На первом этапе весь эякулят обрабатывали в градиенте плотностей в соответствии с протоколом производителя (Sage, ORIGIO, Дания). Далее образец делили на две части: одну оставляли при комнатной температуре (группа сравнения «градиент плотностей»), вторую часть (исследуемая группа «дзета-потенциал») обрабатывали по мембранному потенциалу согласно методике, которая была описана ранее [8, 9]. К обработанному эякуляту добавляли 3 мл культуральной бессывороточной среды Multipurpose Handling Medium (Irvine Scientific, США) и центрифугировали в течение 10 мин на 300 g (Centrifuge CM-6M, ELMI, Латвия). Образовавшийся осадок смешивали с 5 мл культуральной бессывороточной среды MHM. Далее пробирке придавали положительный поверхностный заряд и инкубировали в течение 1 мин при температуре 37 °C. Надосадочную жидкость сливали, а мужские гаметы с отрицательным зарядом мембраны на поверхности пробирки разбавляли 0,2 мл среды Sperm Washing Medium (Irvine Scientific, США). Оценку состояния хроматина проводили с помощью набора Sperm Processor (Индия). Анализ сперматозоидов на ядерный белок (зрелость хроматина) выполняли посредством окрашивания анилиновым синим, окрашивающим стойкие гистоны в ядре сперматозоида. Расчет процентного соотношения протаминов и гистонов осуществляли на фиксированном высушенном мазке. Всего в каждом образце подсчитывали 250 сперматозоидов. После окрашивания мужские половые клетки на мазке делили на две группы: окрашенные синим относили к группе с незрелым хроматином; окрашивание красным головки сперматозоида указывало на замену гистонов на протамины, такие клетки относили к группе «зрелый хроматин». Оценку вели на увеличении ×100 объектив, ×10 окуляр под иммерсионным маслом. Нормальным значением считали показатели производителя: < 15% сперматозоидов, окрашенных синим, незрелый хроматин. Трансмиссионную электронную микроскопию (ТЭМ) сперматозоидов проводили описанным ранее методом [10]. После инкубации часть образцов сперматозоидов осаждали центрифугированием при 700 g в течение 5 мин и фиксировали в 2,5%-м глутаровом альдегиде на 0,1 М буфере для анализа с помощью трансмиссионной электронной микроскопии. Образцы префиксировали 0,5%-м раствором глутарового альдегида в изотоническом растворе NaCl, фиксировали 2,5%-м раствором глутарового альдегида на 0,1 М какодилатном буфере pH 7,2 и OsO₄, после дегидратации заливали в эпоксидную смолу по стандартной методике. Ультратонкие срезы получали на ультрамикротоме Reichert-Jung Ultracut E, монитировали на медные сетки, покрытые формированой пленкой, контрастировали 1%-м водным раствором уранилацетата и 0,4%-м раствором цитрата свинца. Образцы исследовали при мощности 80 кВ с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEM-1011 (JEOL), оборудованного камерой Orius SC1000 W (Gatan, Inc) [10].
Конечной точкой исследования считали содержание сперматозоидов с незрелым хроматином (%).
Для статистического анализа данных использовался программный пакет SPSS. Для проверки статистической значимости различий по категориальным переменным применялся критерий χ2 Мак-Немара. Значения p < 0,05 считали статистически значимыми.
В данное исследование были включены мужчины, средний возраст которых составлял 33,1 ± 2,9 года. У двух из 24 была нормозооспермия (8,3%), у остальных 22 пациентов — тератозооспермия (91,7%). Показатели концентрации, подвижности и морфологии представлены в таблице.
При оценке зрелости хроматина сперматозоидов были получены следующие результаты, представленные на рис. 1. У каждого мужчины в мазке было подсчитано по 250 сперматозоидов для каждой группы.
В результате проведенного исследования было показано, что фракция выделенных по мембранному дзета-потенциалу сперматозоидов имеет статистически значимо меньший процент мужских половых клеток с незрелым хроматином (16,3% против 19,38% выделенных в градиенте плотностей гамет, *p < 0,01). Это позволяет предположить, что данный метод отбора может быть применен в программах лечения бесплодия методами BPT у супружеских пар с фактором мужского бесплодия.
Следует обратить внимание, что все отобранные мужчины имели повышенное содержание сперматозоидов с незрелым хроматином в нативном эякуляте. Именно этим может объясняться бесплодие, связанное с неразвивающимися беременностями у женщин данных мужчин (основной критерий включения — у супруги в анамнезе два и более эпизода невынашивания беременности в сроке до 12 недель гестации).
С помощью трансмиссионной электронной микроскопии были получены микрофотографии головок сперматозоидов с нормальным и незрелым хроматином, которые представлены на рис. 2 и 3.
В настоящем исследовании была применена технология селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу, показавшая свою эффективность при отборе наиболее качественных гамет. Процент сперматозоидов со зрелым хроматином был достоверно выше именно в группе «дзета-потенциал» по сравнению с обработкой спермы в градиенте плотностей и существенно выше по сравнению с нативным эякулятом. Необходимо отметить, что именно состояние хроматина мужских половых клеток оказывает существенное влияние на оплодотворение и последующее развитие эмбриона [11–13].
Согласно современным научным данным о процессах сперматогенеза у человека в постмейтотической гаплоидной фазе происходит ремоделирование хроматина, связанное с потерей гистонов и их заменой на специфические транзиторные белки [14, 15]. Последние в дальнейшем замещаются на протамины — богатые аргинином белки, связанные дисульфидными связями, что приводит к уплотнению хроматина. Уровень компактизации хроматина сперматозоидов в десятки раз превосходит диффузный хроматин соматических клеток. Важно отметить, что нарушения конденсации хроматина и разрывы ДНК сперматозоидов относят к двум принципиально разным процессам [16]. Как пишет Брагина с соавторами, фрагментация ДНК сперматозоидов и нарушения конденсации хроматина — в высокой степени независимые параметры, которые должны учитываться при выяснении генеза бесплодия [16].
Плотная упаковка ДНК сперматозоидов с помощью протаминов обеспечивает, с одной стороны, метаболическую инактивацию и защиту от внешних повреждающих воздействий — с другой. Именно нормальная компактизация хроматина является маркером фертильного сперматозоида, который может привести к рождению здорового ребенка. Доказано, что наиболее успешна только совместная подготовка супружеской пары к беременности и рождению ребенка, особенно это касается пар с привычным невынашиванием беременности. Согласно клиническим рекомендациям по диагностике и тактике ведения женщин с выкидышем на ранних сроках беременности одним из факторов, связанных с невынашиванием, является репродуктивное здоровье полового партнера [17, 18]. В современной литературе, посвященной селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу, показано, что такая пробоподготовка эякулята в программах лечения бесплодия позволяет отобрать мужские гаметы с низкой фрагментацией ДНК и приводит к увеличению частоты наступления беременности [19–21].
Также была определена связь между уровнем экспрессии спермальной мРНК протаминов 1-го и 2-го типов (РRM-1 и РRM-2) и исходами лечения бесплодия при использовании вспомогательных репродуктивных технологий [23, 24]. Авторы убедительно показали, что мРНК протаминов сперматозоидов в эякуляте мужчин значимо различались между группами с беременностью и самопроизвольным выкидышем. Была выявлена тенденция к снижению экспрессии РRM-1 и РRM-2 при нарушениях сперматогенеза и при неэффективных программах лечения, тем самым авторы показали важность процесса ремоделирования хроматина на исходы программ ВРТ.
Таким образом, и наши результаты, и данные литературы указывают на важность компактизации хроматина сперматозоида для эффективного лечения бесплодия методами ВРТ, а предлагаемый метод селекции по мембранному дзета-потенциалу из миллионов мужских половых клеток в эякуляте выделяет фракцию наиболее компетентных.
На современном этапе развития вспомогательных репродуктивных технологий все более очевидным становится важность мужского фактора бесплодия для успешного лечения. Грамотный отбор сперматозоидов, выбор гаметы с максимальным потенциалом фертильности — главная задача клинической эмбриологии сегодня. Рассмотренный метод отбора мужских половых клеток по мембранному дзета-потенциалу, как показали результаты, позволяет выделить фракцию с большим числом зрелых клеток. Конденсация хроматина сперматозоида является важным этапом сперматогенеза млекопитающих, позволяющим защитить отцовскую ДНК от внешних повреждающих факторов и обеспечить фертильность. Однако для более широкого применения этого метода необходимо провести дополнительные исследования, оптимизировать технологии и стандартизировать процессы селекции сперматозоидов на основе дзета-потенциала. Также важно учитывать индивидуальные особенности каждого пациента и его репродуктивного здоровья при применении этого метода.
| Параметр* Parameter* | Мужчины, включенные в исследование Men included in the study (n = 24) |
|---|---|
| Концентрация сперматозоидов (млн/мл) Sperm concentration (million/ml) | 44,5 [32,5–69,1] |
| Доля прогрессивно подвижных сперматозоидов, % Proportion of progressively motile sperm, % | 58 [52,5–61,7] |
| Доля морфологически нормальных сперматозоидов, % Proportion of morphologically normal sperm, % | 2 [2–3] |
*Данные представлена как медиана с интерквартильным размахом. *Data are presented as median with interquartile range.
Zhang M., Ji X., Hu X. et al. Development and validation of a visualized prediction model for early miscarriage risk in patients undergoing IVF/ICSI procedures: a real-world multi-center study. Front Endocrinol (Lausanne). 2024; 14: 1280145. DOI: 10.3389/fendo.2023.1280145
Liao Z., Cai L., Liu C. et al. Nomogram for predicting the risk of preterm delivery after IVF/ICSI treatment: an analysis of 11513 singleton births. Front Endocrinol (Lausanne). 2023; 14: 1065291. DOI: 10.3389/fendo.2023.1065291
Vallet-Buisan M., Mecca R., Jones C. et al. Contribution of semen to early embryo development: fertilization and beyond. Hum Reprod Update. 2023; 29 (4): 395–433. DOI: 10.1093/humupd/dmad006. PMID: 36882116
Лебедев Е.И., Яворская С.Д., Неймарк А.И и соавт. Роль мужского фактора в реализации повторных ранних репродуктивных потерь. Проблемы репродукции. 2022; 3 (28): 96–104. [Lebedev E.I., Yavorskaya S.D., Neimark A.I. et al. The role of the male factor in the implementation of repeated early reproductive losses. Reproduction problems. 2022; 3 (28): 96–104. (In Russ.)].
Chan P.J., Jacobson J.D., Corselli J.U. et al. A simple zeta method for sperm selection based on membrane charge. Fertil. Steril. 2006; 85 (2): 481–6. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2005.07.1302
Zarei-Kheirabadi M., Shayegan Nia E., Tavalaee M. et al. Evaluation of ubiquitin and annexin V in sperm population selected based on density
Nasr Esfahani M.H., Deemh M.R., Tavalaee M. et al. Zeta sperm selection improves pregnancy rate and alters sex ratio in male factor infertility patients: A double-blind, randomized clinical trial. Int. J. Fertil. Steril. 2016; 10 (2): 253–60. DOI: 10.22074/ijfs.2016.4917
Гамидова П.С.К., Смольникова В.Ю., Макарова Н.П. и соавт. Успешный исход экстракорпорального оплодотворения при абсолютной тератоэоспермии после отбора сперматозоида по дзета-потенциалу. Акушерство и гинекология. 2023; 6: 155–159. [Gamidova P.S.K., Smolnikova V.Yu., Makarova N.P. et al. Successful outcome of in vitro fertilization in absolute teratozoospermia after sperm selection by zeta potential. Obstetrics and gynecology. 2023; 6: 155–159. (In Russ.)].
Ionov M., Gontarek W., Bryszewska M. Zeta potential technique for analyzing semen quality. Methods X. 2020; 7 (18). DOI: 10.1016%2Fj. mex.2020.100895
Сысоева А.П., Непша О.С., Макарова Н.П. и соавт. Влияние внеклеточных везикул фолликулярной жидкости с различным профилем мРНК на функциональные свойства сперматозоидов человека. Клеточные технологии в биологии и медицине. 2022; 2: 117–126. [Sysoeva A.P., Nepsha O.S., Makarova N.P. et al. The influence of extracellular vesicles of follicular fluid with different miRNA profiles on the functional properties of human spermatozoa. Cell technologies in biology and medicine. 2022; 2: 117–126. (In Russ.)].
Lee S.C., Adams D.W., Ipsaro J.J. et al. Chromatin remodeling of histone H3 variants by DDM1 underlies epigenetic inheritance of DNA methylation. Cell. 2023; 186 (19): 4100–4116.ets. DOI: 10.1016/j. cell.2023.08.001
Trautman A. Effects of Alcohol Use on Sperm Chromatin Structure. S D Med. 2023; 9 (76): 408.
Schlegel P.N. Can sperm quality affect reproductive outcomes? Fertil Steril. 2023; 4 (120): 707–708. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2023.08.007
Коршунов М.Н., Коршунова Е.С., Кызласов П.С. и соавт. Структурные нарушения хроматина сперматозоидов. Патофизиологические аспекты. Клиническая значимость. Вестник урологии. 2021; 1 (9): 95–104. DOI: 10.21886/2308-6424-2021-9-1-95-104 [Korshunov M.N., Korshunova E.S., Kyzlasov P.S. et al. Structural disorders of sperm chromatin. Pathophysiological aspects. Clinical relevance. Journal of Urology. 2021; 1 (9): 95–104. DOI: 10.21886/2308-6424-2021-9-1-95-104 (In Russ.)].
Fuentes-Mascorro G., Serrano H., Rosado A. Sperm chromatin. Arch Androl. 2000; 45 (3): 215–25. DOI: 10.1080/01485010050193995
Брагина Е.Е., Арифулин Е.А., Лазарева Е.М и соавт. Нарушение конденсации хроматина сперматозоидов и фрагментация ДНК сперматозоидов: есть ли корреляция? Андрология и генитальная хирургия. 2017; 1. [Bragina E.E., Arifulin E.A., Lazareva E.M. et al. Impaired sperm chromatin condensation and sperm DNA fragmentation: is there a correlation? Andrology and genital surgery. 2017; 1. (In Russ.)].
Лебедева Е.И., Яворская С.Д., Неймарк А.И. и соавт. Роль мужского фактора в реализации повторных ранних репродуктивных потерь. Проблемы репродукции. 2022; 3 (28): 96–104. [Lebedeva E.I., Yavorskaya S.D., Neimark A.I. et al. The role of the male factor in the implementation of repeated early reproductive losses. Reproduction problems. 2022; 3 (28): 96–104. (In Russ.)].
Клинические рекомендации (протокол лечения). Привычный выкидыш. Дата пересмотра 2022. [Clinical recommendations (treatment protocol). Habitual miscarriage. Revision date 2022. (In Russ.)].
Tehrani M., Amirian M., Jalali M. et al. Role of the Zeta Method in Intracytoplasmic Sperm Injection Outcomes in High Sperm DNA Fragmentation in Oligoasthenozoospermic Men. Galen Med J. 2018; 6 (12).
Nasr Esfahani M.H., Deemh M.R., Tavalaee M. et al. Zeta Sperm Selection Improves Pregnancy Rate and Alters Sex Ratio in Male Factor Infertility Patients: A Double-Blind, Randomized Clinical Trial. Int J Fertil Steril. 2016; 2 (10): 253–60. DOI: 10.22074/ijfs.2016.4917
Ghorbani-Sini R., Izadi T., Tavalaee M. et al. Comparison of sperm telomere length between two sperm selection procedures: Density gradient centrifugation and zeta potential. Int J Fertil Steril. 2020; 14: 51–56. DOI: 10.22074%2Fijfs.2020.5981
Vahidi S., Narimani N., Dehghan Marvast L. et al. Comparison of zeta potential and physiological intracytoplasmic sperm injection in obtaining sperms with a lower DNA fragmentation index: A cross-sectional study. Int J Reprod Biomed. 2022; 5 (20): 357–364. DOI: 10.18502/ijrm.v20i5.11050
Смольникова В.Ю., Краснощока О.Е., Бурменская О.В. и соавт. Возможности прогнозирования исходов вспомогательных репродуктивных технологий по уровню спермальных мРНК. Акушерство и гинекология. 2012; 2: 36–40. [Smolnikova V.Yu., Krasnoshchoka O.E., Burmenskaya O.V. et al. Possibilities of predicting the outcomes of assisted reproductive technologies based on the level of sperm mRNA. Obstetrics and gynecology. 2012; 2: 36–40. (In Russ.)].
Бирюкова А.М., Мартиросян Я.О., Ковальчик А.И., Хубаева Д.Г. Диагностика и лечение бесплодия. Клиническая лекция. Медицинский оппонент. 2021; 2 (14): 41–45. [Birukova A.M., Martirosyan Ya.O., Kovalchuk A.I., Khubaeva D.G. Infertility diagnosis and treatment. Clinical lecture. Meditsinskiiy opponent = Medical opponent. 2021; 2 (14): 41–45. (In Russ.)].
Вклад авторов. П.С. Гамидова, Н.П. Макарова, В.Ю. Смольникова, Н.Н. Лобанова, Е.В. Кулакова, Е.Е. Брагина: разработка исследования, получение данных для анализа, обзор публикаций по теме статьи, статистический анализ полученных данных, написание текста рукописи.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки.
Authors contributions. P.S. Gamidova, N.P. Makarova, V. Yu. Smolnikova, N.N. Lobanova, E.V. Kulakova, E.E. Bragina: research development, obtaining data for analysis, reviewing publications on the topic of the article, statistical analysis of the obtained data, article writing.
Conflict of interest. The authors declare the absence of obvious and potential conflicts of interest related to the publication of this article.
Financing. The study was performed without external funding.
Статья поступила: 25.03.2024. Принята к публикации: 25.04.2024.
Accepted for publication: 25.03.2024. Article received: 25.04.2024.
Гамидова Парвин Сафаил кызы, аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова.
Макарова Наталья Петровна, д.б.н., ведущий научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова.
Смольникова Вероника Юрьевна, д.м.н., акушер-гинеколог, ведущий научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова.
Лобанова Наталия Николаевна, эмбриолог отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова.
Кулакова Елена Владимировна, д.м.н, старший научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова*.
Брагина Елизавета Ефимовна, д.б.н., старший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова». Адрес: 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 40.
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: +7 (495) 531-44-44. E-mail: med@oparina4.ru.
Gamidova Parvin Safail kyzy, graduate student of the Department of Assistive Technologies in the Treatment of Infertility named after Professor B.V. Leonov.
Makarova Natalya Petrovna, Doctor of B. D., leading researcher at the Department of Assistive Technologies in the Treatment of Infertility named after Professor B.V. Leonov.
Smolnikova Veronika Yuryevna, MD, obstetrician-gynecologist, leading researcher at the Department of Assistive Technologies in the Treatment of Infertility named after Professor B.V. Leonova.
Lobanova Natalia Nikolaevna, embryologist of the Department of Assistive Technologies in the Treatment of Infertility named after Professor B.V. Leonov.
Kulakova Elena Vladimirovna, MD, Senior Researcher, Department of Assistive Technologies in the Treatment of Infertility named after Professor B.V. Leonov*.
Bragina Elizaveta Efimovna, Doctor of B. Sc., senior researcher at the Research Institute of Physical and Chemical Biology named after A.N. Belozersky Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education «Moscow State University named after M.V. Lomonosov». Address: 119234, Russia, Moscow, Leninskie Gory, 1, building 40.
FSBI «National medical research center for obstetrics, gynecology and perinatology named after academician V.I. Kulakov» Ministry of Health of the Russian Federation. Address: 117997, Russia, Moscow, st. Academician Oparin, 4. Phone: +7 (495) 531-44-44. E-mail: med@oparina4.ru.